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蛋白免疫印跡樣本采樣要求
發(fā)布時(shí)間:2024-03-07
作者:里來醫(yī)學(xué)

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1、動(dòng)物組織采集

?取材應(yīng)在冰上進(jìn)行,取材后組織用生理鹽水沖洗干凈,去除血漬和污物,并剔除非研究所需的組織特別是腸道組織,請(qǐng)一定注意清理干凈腸道內(nèi)容物;部分特別容易降解的樣本,如胰腺,有條件可以使用“蛋白穩(wěn)定保存液”“蛋白穩(wěn)定保存液”具體使用方法和用量,建議參考對(duì)應(yīng)廠家的試劑說明書。

② 吸干水漬并切小塊,放入已標(biāo)記的凍存管中,液氮速凍后,轉(zhuǎn)運(yùn)至-80℃冰箱保存,運(yùn)輸時(shí)請(qǐng)使用大體積干冰運(yùn)輸。

干冰消耗量約為4-5kg/24h(根據(jù)溫度會(huì)有所變動(dòng)),請(qǐng)根據(jù)寄送時(shí)長訂購足量干冰,用厚實(shí)的泡沫箱進(jìn)行運(yùn)輸。

2、細(xì)胞樣本準(zhǔn)備

① 細(xì)胞培養(yǎng)或處理結(jié)束后,去除培養(yǎng)液;

② 用滅菌后的PBS緩沖液快速?zèng)_洗細(xì)胞,而后加入少量滅菌后的PBS,細(xì)胞刮將細(xì)胞刮下,移于1.5ml離心管中;

③ 快速離心去除上清,收集細(xì)胞,液氮速凍后放入干冰或于-80℃冰箱中保存。

3、血液樣本采集

全血提取白細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè):

將新鮮全血收集于肝素鈉(綠頭)EDTA(紫頭)抗凝管中,上下輕輕顛倒幾次使血液與抗凝劑充分混勻,置于4°C或冰盒中正立放置,在離體1h之內(nèi)進(jìn)行白細(xì)胞提?。ò准?xì)胞采集具體方法需參考各種分離液試劑說明書)。

如果遠(yuǎn)距離運(yùn)輸不能保證時(shí)效性,請(qǐng)客戶自己提取好白細(xì)胞后,送白細(xì)胞沉淀送檢

4菌類

液體培養(yǎng)基:

挑取單菌落于50ml液體培養(yǎng)基中,適宜溫度培養(yǎng)過夜,并在對(duì)數(shù)生長期進(jìn)行菌體采集。培養(yǎng)好的菌液適量轉(zhuǎn)入合適的離心管中,高速離心收集菌體,棄去上層培養(yǎng)基,用封口膜封口后液氮速凍,轉(zhuǎn)運(yùn)至-80℃冰箱保存,大體積干冰運(yùn)輸;

固體或半固體培養(yǎng)菌種收集:

涂布平板培養(yǎng)的微生物,在菌體生產(chǎn)最旺盛時(shí)期刮下,置于1.5或2.0ml的離心管中,迅速液氮速凍。-80℃冰箱保存,轉(zhuǎn)運(yùn)至-80℃冰箱保存,大體積干冰運(yùn)輸。

?

樣本準(zhǔn)備注意事項(xiàng):

① 為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果,需盡量準(zhǔn)備新鮮或正確保存的樣品或蛋白提取液,陽性對(duì)照樣品(細(xì)胞或組織)等。

② WB實(shí)驗(yàn)樣品參考樣本含量:

1)細(xì)胞不少于1×10^7個(gè);

(2)組織樣品不少于50mg;

(3)總蛋白濃度(細(xì)胞不低于3μg/μl,組織不低于5μg/μl);

③ 樣本標(biāo)簽勿粘貼在EP管或錫箔紙上,低溫下標(biāo)簽紙易脫落,建議使用記號(hào)筆標(biāo)記;

④ 細(xì)胞樣本不建議采用粘稠保護(hù)劑保存,否則將無法離心收集存放在保護(hù)劑的細(xì)胞樣本。

如果組織是多平臺(tái)之間共用樣本,強(qiáng)烈建議客戶在送樣之前進(jìn)行分裝,分別送給對(duì)應(yīng)平臺(tái),避免影響時(shí)效性,規(guī)避樣本反復(fù)凍融的風(fēng)險(xiǎn)

蛋白免疫印跡樣本采樣要求
發(fā)布時(shí)間:2024-03-07
作者:里來醫(yī)學(xué)

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1、動(dòng)物組織采集

?取材應(yīng)在冰上進(jìn)行,取材后組織用生理鹽水沖洗干凈,去除血漬和污物,并剔除非研究所需的組織特別是腸道組織,請(qǐng)一定注意清理干凈腸道內(nèi)容物;部分特別容易降解的樣本,如胰腺,有條件可以使用“蛋白穩(wěn)定保存液”“蛋白穩(wěn)定保存液”具體使用方法和用量,建議參考對(duì)應(yīng)廠家的試劑說明書。

② 吸干水漬并切小塊,放入已標(biāo)記的凍存管中,液氮速凍后,轉(zhuǎn)運(yùn)至-80℃冰箱保存,運(yùn)輸時(shí)請(qǐng)使用大體積干冰運(yùn)輸。

干冰消耗量約為4-5kg/24h(根據(jù)溫度會(huì)有所變動(dòng)),請(qǐng)根據(jù)寄送時(shí)長訂購足量干冰,用厚實(shí)的泡沫箱進(jìn)行運(yùn)輸。

2、細(xì)胞樣本準(zhǔn)備

① 細(xì)胞培養(yǎng)或處理結(jié)束后,去除培養(yǎng)液;

② 用滅菌后的PBS緩沖液快速?zèng)_洗細(xì)胞,而后加入少量滅菌后的PBS,細(xì)胞刮將細(xì)胞刮下,移于1.5ml離心管中;

③ 快速離心去除上清,收集細(xì)胞,液氮速凍后放入干冰或于-80℃冰箱中保存。

3、血液樣本采集

全血提取白細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè):

將新鮮全血收集于肝素鈉(綠頭)EDTA(紫頭)抗凝管中,上下輕輕顛倒幾次使血液與抗凝劑充分混勻,置于4°C或冰盒中正立放置,在離體1h之內(nèi)進(jìn)行白細(xì)胞提取(白細(xì)胞采集具體方法需參考各種分離液試劑說明書)。

如果遠(yuǎn)距離運(yùn)輸不能保證時(shí)效性,請(qǐng)客戶自己提取好白細(xì)胞后,送白細(xì)胞沉淀送檢

4、菌類

液體培養(yǎng)基:

挑取單菌落于50ml液體培養(yǎng)基中,適宜溫度培養(yǎng)過夜,并在對(duì)數(shù)生長期進(jìn)行菌體采集。培養(yǎng)好的菌液適量轉(zhuǎn)入合適的離心管中,高速離心收集菌體,棄去上層培養(yǎng)基,用封口膜封口后液氮速凍,轉(zhuǎn)運(yùn)至-80℃冰箱保存,大體積干冰運(yùn)輸;

固體或半固體培養(yǎng)菌種收集:

涂布平板培養(yǎng)的微生物,在菌體生產(chǎn)最旺盛時(shí)期刮下,置于1.5或2.0ml的離心管中,迅速液氮速凍。-80℃冰箱保存,轉(zhuǎn)運(yùn)至-80℃冰箱保存,大體積干冰運(yùn)輸。

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樣本準(zhǔn)備注意事項(xiàng):

① 為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果,需盡量準(zhǔn)備新鮮或正確保存的樣品或蛋白提取液,陽性對(duì)照樣品(細(xì)胞或組織)等。

② WB實(shí)驗(yàn)樣品參考樣本含量:

1)細(xì)胞不少于1×10^7個(gè);

(2)組織樣品不少于50mg;

(3)總蛋白濃度(細(xì)胞不低于3μg/μl,組織不低于5μg/μl);

③ 樣本標(biāo)簽勿粘貼在EP管或錫箔紙上,低溫下標(biāo)簽紙易脫落,建議使用記號(hào)筆標(biāo)記;

④ 細(xì)胞樣本不建議采用粘稠保護(hù)劑保存,否則將無法離心收集存放在保護(hù)劑的細(xì)胞樣本。

如果組織是多平臺(tái)之間共用樣本,強(qiáng)烈建議客戶在送樣之前進(jìn)行分裝,分別送給對(duì)應(yīng)平臺(tái),避免影響時(shí)效性,規(guī)避樣本反復(fù)凍融的風(fēng)險(xiǎn)

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